El Caldo Lauril Sulfato Triptosa, conocido comúnmente como LST Broth, es el medio de cultivo clásico empleado en la técnica de Número Más Probable (NMP). Su función principal es la detección y enumeración de bacterias coliformes en diversas muestras, incluyendo agua, aguas residuales, productos lácteos y otros alimentos.
Fundamentos y formulación del medio
El caldo de triptosa de Lauril se prepara siguiendo la formulación original establecida por Mallmann y Darby. Estos investigadores lograron mejoras significativas en el rendimiento del medio al demostrar que la triptosa, a una concentración del 2%, favorece una fase de crecimiento logarítmico temprano más eficiente en comparación con la peptona de carne convencional.
Además, la inclusión de tampones de fosfato y cloruro de sodio en su composición permite optimizar la producción de gas mediante la fermentación de la lactosa, un proceso clave para identificar la presencia de microorganismos coliformes en medios líquidos.
Procedimiento y confirmación de resultados
El LST actúa como un medio selectivo que facilita el crecimiento de bacterias coliformes. Ante la obtención de tubos positivos en este medio, se recomienda realizar una confirmación posterior mediante la siembra en Caldo Bilis Verde Brillante (BGBL), lo que asegura la especificidad del análisis.
Alternativas avanzadas
Para mejorar la eficiencia en el laboratorio, existen alternativas tecnológicas que permiten agilizar el proceso de detección:
- Sustitución directa del LST Broth por Lauryl Broth MUG.
- Uso de medios cromofluorogénicos (como Colicult) o agares cromogénicos (como MugPlus).
Estas opciones permiten realizar la confirmación y enumeración simultánea de E. coli, reduciendo los tiempos de respuesta frente a los métodos tradicionales.
Materiales y herramientas de siembra
La precisión en el análisis microbiológico depende no solo del medio, sino también de las herramientas utilizadas para la manipulación de muestras:
| Herramienta | Características | Aplicación |
|---|---|---|
| Asas calibradas (10µl) | Fabricadas en poliestireno, estériles, alta robustez. | Siembra cualitativa y cuantitativa en placas de Petri; conteo de colonias. |
| Espátula Drigalsky | Punta inclinada, cantos redondeados, estéril. | Siembra por diseminación en superficie para evitar roturas del medio sólido. |
Es fundamental recordar que el usuario es el único responsable de la correcta eliminación de los microorganismos y residuos generados durante los ensayos, siempre bajo el cumplimiento de la legislación medioambiental vigente.